• 没有显微镜定量转染效率
  • 测量WT-HeLa细胞和GFP + +海拉细胞的比率用VANTAstar底阅读矩阵扫描功能。
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没有显微镜定量转染效率

2023年1月20

在哺乳动物细胞中转染方法用于介绍或改变细胞的遗传物质,通常需要更大的稳定细胞系生产等实验研究,研究基因调控,突变分析,或大规模生产蛋白质。

转染方法通常小于100%成功;细胞类型和目标基因类型会影响成功率。因此重要的衡量转染效率,细胞的百分比报告表达感兴趣的基因转染细胞内的人口。

使转染效率有待确定,报告基因编码一个产品,可以量化往往是附加到感兴趣的目标基因。报告基因通常要么荧光蛋白质,酶,或随后可以测量保持酶的底物。

荧光蛋白质是有利的,因为他们可以以活细胞;这种方法通常是使用显微镜或单个细胞流式细胞仪分析评估。这些方法虽然有效劳动密集型和需要昂贵的专业设备。

多模微型板块读者荧光,发光,紫外线(UV)企业吸收能力等VANTAstar®从BMG LABTECH可以提供一个易于使用的,具有成本效益的替代衡量这些化验。

这是证明了量化的已知比率野生型(WT)海拉细胞GFP表达海拉细胞。镀20000细胞与不同的比率从0% (WT海拉细胞)到100% (GFP海拉细胞)。GFP信号测量总细胞数,使用赫斯特33342年。

使用15 x 15 VANTAstar矩阵扫描直径6毫米,和底部阅读检测,用于捕捉GFP和赫斯特33342年的荧光信号。可用波长预设VANTAstar荧光团的图书馆对所有常见的蛋白质和染料。VANTAstar LVF单色仪的™提供完整的灵活性来测量荧光蛋白质和染料从紫外到红外(IR)在业界领先的灵敏度范围限制。

GFP荧光信号显示了一个线性关系GFP标记细胞的百分比显示的准确性r2 = 0.9997和10.5%的精度的简历。一致的赫斯特33342年信号确认电镀和总细胞数的可靠性。

多模标如VANTAstar提供一个自动化替代显微镜检测转染效率和其他细胞的化验。柔性LVF单色仪™VANTAstar设计使用户能够选择最佳的试验检测灵敏度的方法而不需要妥协。除了这些荧光化验,用户也可以选择不同的试验在吸光度读数和发光,并可以控制环境标,设置温度、震动和气体浓度维持生活细胞样本。

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